含绿色荧光蛋白基因和猪瘟E2基因的伪狂犬病毒Bartha-K61株TK基因缺失转移载体的构建

• 作者: 张雪莲 范伟兴 赵宏坤 陈溥言 魏荣
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 伪狂犬病毒Bartha-K61株 TK基因 EGFP基因 猪瘟病毒E2基因 基因缺失 转移载体
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-8
• 页数: 6页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2003.03.001

摘要

提取伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据Genbank已发表的PRV Kaplan株UL区UL25、UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,这两对引物分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL25、全部UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失270个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上,获得pSKLR;再将绿色荧光蛋白载体pEGFP-C1上含GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLKG;又将猪瘟病毒1.23 kb的E2(CSFV-E2)基因片段插入pSKLRG的多克隆位点的Bg1Ⅱ与PstⅠ之间获得转移载体pSKLRGE2.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学动物医学院	269	2875	28.0	40.0
2	赵宏坤	山东农业大学动物科技学院	109	1204	18.0	28.0
3	范伟兴	南京农业大学动物医学院	26	253	12.0	15.0
7	张雪莲	南京农业大学动物医学院	14	109	8.0	10.0
8	魏荣	南京农业大学动物医学院	7	64	5.0	7.0