伪狂犬病毒TK基因缺失通用转移载体的构建及初步应用

• 作者: 唐满华 梁桂益 邵定勇 陈瑞爱 韩静芳
• 来源期刊: 现代农业科技
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病毒 TK基因 通用转移载体
• 年，卷（期）: 2009,（15）
• 所属期刊栏目: 动物研究
• 页码范围: 308-310
• 页数: 3页
• 分类号: S858.292
• 字数: 3488字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5739.2009.15.215

摘要

以伪狂犬病毒为戢体表达其他痛原体抗原蛋白是伪狂犬痛疫苗研究的一个重要方向.根据已发表的伪狂犬病毒(PRV)Ra株TK基因序列设计2对引物,用PCR方法得到同源左右臂,克隆入PUC19载体中.利用平末端连接的方法将绿色荧光蛋白(EGFP)的基因表达盒插入到缺失位点,并在下游引入1个多克隆位点,构建缺失通用转移载体PUC19TK-EGFP.用脂质体转染试剂盒将PUC19TK-EGFP和PRv-Ra株的基因组共转染BHK细胞,以EGFP为标记基因,用噬斑法得到纯化的重组病毒,命名为TK/EGFP,为研制以伪狂犬病毒为载体的二价或多价基因工程疫苗奠定了物质基础.