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基于Overlap PCR方法进行猪伪狂犬病毒TK基因缺失载体的构建、鉴定及生物学分析
基于Overlap PCR方法进行猪伪狂犬病毒TK基因缺失载体的构建、鉴定及生物学分析
作者:
吕素芳
毕研丽
沈志强
郭广君
魏凤
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
伪狂犬病病毒
TK基因
Overlap PCR
转移载体
摘要:
构建伪狂犬病毒TK基因缺失载体,在BHK-21细胞中表达,为研究TK基因生物学活性及其基因工程疫苗研制提供科学依据.根据伪狂犬病病毒sA株TK基因序列,设计引物,通过Overlap PCR扩增到长约1814bp的TK基因,与PMDl8-T载体连接,将鉴定为阳性的重组质粒pMD-TK与表达载体pBluescript SK(+)分别用限制性内切酶BamH I,HindIII酶切后,定向亚克隆;重组表达质粒pBTK经PCR、酶切鉴定后,阳性质粒进行测序.利用脂质体介导阳性重组质粒pBTK转染BHK.21细胞,通过噬斑纯化获得获得重组病毒PRV/TK-.该重组病毒在体外传15代后仍具有良好的遗传稳定性,应用PCR技术可从体外反复传代的阳性细胞基因组中扩增到TK基因,其TCID50毒价是5.75.本实验为PRV基因功能的研究及PRV基因缺失苗的研究提供了基础.
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伪狂犬病毒Bartha-K61株
TK基因
EGFP基因
猪瘟病毒E2基因
基因缺失
转移载体
内容分析
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引文网络
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文献信息
篇名
基于Overlap PCR方法进行猪伪狂犬病毒TK基因缺失载体的构建、鉴定及生物学分析
来源期刊
中国动物检疫
学科
农学
关键词
伪狂犬病病毒
TK基因
Overlap PCR
转移载体
年,卷(期)
2011,(2)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
40-43
页数
分类号
S852.659.1
字数
3960字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1005-944X.2011.02.022
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
郭广君
26
107
6.0
9.0
3
沈志强
525
1950
18.0
25.0
5
吕素芳
35
137
6.0
10.0
8
魏凤
82
262
8.0
12.0
12
毕研丽
5
18
3.0
4.0
传播情况
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(47)
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二级引证文献(0)
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2019(6)
引证文献(0)
二级引证文献(6)
2020(2)
引证文献(0)
二级引证文献(2)
研究主题发展历程
节点文献
伪狂犬病病毒
TK基因
Overlap PCR
转移载体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国动物检疫
主办单位:
中国动物卫生与流行病学中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1005-944X
CN:
37-1246/S
开本:
16开
出版地:
青岛市南京路369号
邮发代号:
24-112
创刊时间:
1982
语种:
chi
出版文献量(篇)
8034
总下载数(次)
8
总被引数(次)
21278
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