表达犬瘟热H基因重组伪狂犬病毒的构建及生物学特性研究

• 作者: 孙程龙 扈荣良 李业伟 王颖 韩乃君
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病毒 犬瘟热病毒 H基因 病毒栽体
• 年，卷（期）: 2011,（24）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 14899-14901,14974
• 分类号: S852.65+5
• 字数: 4176字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.24.132

摘要

[目的]构建表达犬瘟热Onderstepoort株H蛋白的重组伪狂犬病毒,并研究其生物学特性.[方法]通过RT-PCR方法获得Onderstepoort株H基因,插入pcDNA3.1(+)建立好完整的真核细胞表达盒并将此表达盒亚克隆到转移栽体p8AA上.在此基础上再将报告基因LacZ的表达盒插入转移栽体,命名为p8AAZH.将p8AAZH与伪狂犬病毒(PRV) Bartha-K61株基因组共转染至BHK-21细胞中进行基因重组包装出毒,待细胞病变后收集病毒液.通过蓝色蚀斑筛选、PCR、电镜观察以及Western blot,筛选纯化重组病毒并鉴定目的基因的表达.同时在BHK-21细胞上测定重组病毒的生长曲线.[结果]获得了表达H蛋白的重组伪狂犬病毒,重组病毒与亲本Bartha-K61株的生长曲线、病变特征相一致.[结论]成功构建了表达犬瘟热Onderstepoort株H蛋白的重组伪狂犬病毒,H基因的插入不影响重组病毒的增殖特性,为犬瘟热活病毒载体疫苗的研制与开发打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	扈荣良	军事医学科学院军事兽医研究所	92	445	11.0	15.0
2	孙程龙	吉林大学畜牧兽医学院	3	7	2.0	2.0
4	李业伟	吉林大学畜牧兽医学院	3	7	2.0	2.0
6	王颖	军事医学科学院军事兽医研究所	16	60	4.0	6.0
11	韩乃君	吉林大学畜牧兽医学院	1	4	1.0	1.0