大肠杆菌碱性磷酸酶突变体的构建及其结构与功能研究

• 作者: 向本琼 李宁 王秋颖
• 来源期刊: 北京师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠杆菌碱性磷酸酶 重叠延伸PCR 突变体 特性分析 荧光光谱
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 页码范围: 647-652
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4058字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0476-0301.2007.06.015

摘要

以大肠杆菌碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)高活性突变株(L138PG233S)为亲本,采用重叠延伸PCR的方法进行定点突变,成功获得了氨基酸替换突变体3个,并对它们的酶活性、特性、内源荧光发射峰等与亲本酶进行了比较分析.结果发现:与亲本酶相比,突变体酶的酶活性降低了18%～85%,Vmax值降低,Km增加,内源荧光发射峰λmax增大等.与亲本酶相同,Zn2+,Mn2+,Mg2+仍是它们的激活剂,Na3PO4是它们的抑制剂;这些实验结果说明突变体酶活性的降低直接与其构象变化有关,被替换的氨基酸在维持碱性磷酸酶的结构和功能方面具有特定的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宁	北京师范大学生命科学学院	58	403	12.0	19.0
2	向本琼	北京师范大学生命科学学院	35	278	7.0	16.0
3	王秋颖		11	22	3.0	4.0