三唑磷酶联免疫吸附测定法中包被抗体稳定剂的研究

• 作者: 朱国念 桂文君 梁赤周 王姝婷 王春梅
• 来源期刊: 农药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 酶联免疫吸附测定法 稳定剂 三唑磷 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 165-171
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11
• 字数: 6014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1008-7303.2007.02.012

摘要

选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇(PEG)、卵清蛋白(OVA)、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理(37℃,1 h)后,再在37℃下连续贮存 7 d,利用直接竞争ELISA法对不同稳定剂处理的包被抗体免疫活性、亲合性及检测灵敏度进行检测,并与未经稳定剂处理的对照进行比较,筛选得到效果较好的稳定剂1(质量分数:甘油2.5%,氨基酸1.5%,蛋白胨3.0%,离子螯合剂0.1%,防腐剂0.01%).用稳定剂1处理包被抗体后,4～6℃下保存半年及37℃下保存14 d的试验结果表明,抗体的活性相对保持率分别为97.8%和94.2%;其免疫活性、亲合性(I50分别为68.43和54.38 ng/mL)及灵敏度(I10分别为3.72和 3.22 ng/mL)与常规方法包被的抗体(包被好后不贮存,直接检测,I50为60.73 ng/mL,I10为 3.11 ng/mL)无明显差异;冻融试验表明,经稳定剂1处理的三唑磷抗体在反复冻-融次数不超过8次时其活性也是稳定的.说明筛选出的稳定剂可以显著提高三唑磷多克隆包被抗体的稳定性,可用于三唑磷ELISA试剂盒的生产.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱国念	浙江大学农药与环境毒理研究所	217	3209	30.0	41.0
2	桂文君	浙江大学农药与环境毒理研究所	30	423	14.0	19.0
3	王春梅	浙江大学农药与环境毒理研究所	5	60	4.0	5.0
4	王姝婷	浙江大学农药与环境毒理研究所	3	38	3.0	3.0