人PAK1重组蛋白质的表达及在人胃癌BGC-823细胞内定位

• 作者: 刘芙蓉 周颖 李丰 李家滨 王桂玲 赵大林
• 来源期刊: 细胞生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PAK1 基因克隆 蛋白表达 转染 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 86-90
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7666.2007.01.018

摘要

为检测人PAK1在原核细胞中的表达情况及在真核细胞中的定位,利用RT-PCR技术获得PAK1目的基因,构建GST融合蛋白原核表达载体pGEX-5X-1/PAK1,IPTG诱导后进行SDS-PAGE及Western印迹检测,并用体外激酶实验测定其生物学活性;同时,构建带绿色荧光蛋白(GFP)标签的真核表达载体pEGFP/PAK1,利用脂质体法转入人胃癌BGC-823细胞系中,在共焦激光扫描显微镜下观察癌细胞中绿色荧光蛋白的表达.结果表明,pGEX-5X-1/PAK1载体能在大肠杆菌BL-21中正确表达GST-PAK1融合蛋白,大小约为94 kDa,具有生物活性;PAK1绿色荧光蛋白定位于细胞浆.上述研究为进一步探索PAK1的生物学特性及信号转导通路打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘芙蓉	中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室	16	108	7.0	10.0
2	赵大林	沈阳体育学院生理学教研室	23	87	6.0	8.0
3	李丰	中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室	26	92	4.0	9.0
4	王桂玲	中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室	25	137	7.0	11.0
5	周颖	中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室	7	6	2.0	2.0
6	李家滨	中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室	4	12	2.0	3.0