B淋巴细胞活化因子特异的单链DNA适体的人工进化

• 作者: 仲人前 吴传勇 周琳 曾贤铭 杨再兴 梁艳 蒋廷旺
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: B淋巴细胞活化因子 适体 单链DNA 指数富集的配体进化技术 进化
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 230-234
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.03.006

摘要

目的:进化筛选与B淋巴细胞活化因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)特异结合的单链DNA适体,鉴定其结合力.方法:应用指数方式富集的配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,将随机序列寡核苷酸文库与BAFF分子相互作用,分离出结合的寡核苷酸配体,经反复扩增、筛选数个循环,获得重组人BAFF的单链DNA适体,应用Dot blotting鉴定其结合力,酶联法比较各适体序列对BAFF的相对结合力.结果:优化实验条件后成功进行了13轮次筛选,随机选取42个阳性克隆测序,各序列GC含量最高达75%,分为6类不同序列;Dot blotting证实这些适体均与BAFF相结合;比较各适体序列结合BAFF的光密度值,以序列44光密度值最高(0.752,P《0.05),具有对BAFF相对最高结合力.结论:首次成功获得特异结合BAFF的高亲和力的单链DNA适体,为研发防治肿瘤和自身免疫疾病新药奠定了基础.