重组质粒pcFlaA在青石斑鱼肌肉中的表达研究

• 作者: 庄轩 王世峰 王军 苏永全 覃映雪
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 农学
• 关键词: DNA疫苗 哈维氏弧菌 青石斑鱼
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 资源环境与生物技术
• 页码范围: 761-764
• 页数: 4页
• 分类号: S9
• 字数: 2898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2007.07.019

摘要

在哈维氏弧菌TS-628菌株鞭毛丝蛋白FlaA基因末端加上一段编码Flag短肽的核苷酸序列作为检测标记后,将该基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),酶切、PCR扩增及重组质粒测序证实基因片段插入正确,将该重组质粒命名为pcFlaA.将pcFlaA以肌肉注射方式免疫青石斑鱼.免疫后第7天开始检测鞭毛丝蛋白在石斑鱼肌肉中的表达状况,之后每隔1周检测1次,共检测4次.首先采用PCR技术在DNA水平检测重组质粒转染石斑鱼肌肉细胞的情况,再以RT-PCR法在mRNA水平上检测转染质粒在鱼肌肉中的转录,最后以免疫组化染色技术在蛋白质水平上检测目的蛋白的表达.结果在DNA及mRNA水平上均可检测到目的条带,在蛋白质水平上可检测到明显阳性位点,由此证实pcFlaA可以转染石斑鱼肌肉细胞并可在其中进行表达,而且质粒在鱼体内持续表达的时间至少1个月.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王军	厦门大学海洋系亚热带海洋研究所	144	2234	25.0	39.0
2	苏永全	厦门大学海洋系亚热带海洋研究所	145	2696	29.0	44.0
3	覃映雪	厦门大学海洋系亚热带海洋研究所	14	122	6.0	10.0
7	庄轩	厦门大学海洋系亚热带海洋研究所	5	42	3.0	5.0
8	王世峰	厦门大学海洋系亚热带海洋研究所	1	5	1.0	1.0