广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)克隆及原核表达

• 作者: 兰干球 杨秀荣 梁方方 王爱德 莫毅 蒋和生 蒋钦杨 郭亚芬
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 广西巴马小型猪 卵泡抑素 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究·论著
• 页码范围: 26-29,5
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2007.06.006

摘要

目的 通过RT-PCR扩增获得广西巴马小型猪Follistatin的cDNA全序列,经克隆测序分析其cDNA序列结构,进而构建pET-F0原核表达质粒,使用IPTG诱导表达获得其融合蛋白,为将来进一步研究Follistatin对广西巴马小型猪肌肉生长和繁殖性能的影响莫定基础.方法 从广西大学巴马小型猪卵巢中提取总RNA,并以其为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),在合成的特异性引物引导下,扩增获得广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)cDNA的全序列,长度为1 035 bp.将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行序列测定及分析.结果 广西巴马小型猪卵泡抑素cDNA序列与GenBank中已报道的家猪卵泡抑素同源性高达99.4%.同时,将目的 基因插入到原核表达载体pET 32a+多克隆位点中,构建了Follistatin的原核表达载体,并转化于大肠杆菌BL21.转化菌经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析.结论 实验已成功地表达了Follistatin的融合蛋白(约58.4 ku).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋钦杨	广西大学动物科学技术学院	97	256	8.0	12.0
2	杨秀荣	广西大学动物科学技术学院	40	88	5.0	8.0
3	蒋和生	广西大学动物科学技术学院	68	277	9.0	12.0
4	莫毅	广西大学动物科学技术学院	12	71	5.0	8.0
5	兰干球	广西大学动物科学技术学院	92	263	7.0	12.0
6	郭亚芬	广西大学动物科学技术学院	113	570	9.0	20.0
7	王爱德	广西大学动物科学技术学院	40	710	14.0	26.0
8	梁方方		21	71	5.0	7.0