嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究

• 作者: 刘英 李建勇 杨鎏 毛曦
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 Ad5/F35腺病毒载体 转染 绿色荧光蛋白 大鼠
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1075-1079,封2
• 页数: 6页
• 分类号: R331.22
• 字数: 4250字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2007.10.003

摘要

目的:研究携带35型腺病毒纤毛的嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35能否有效地将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察eGFP基因在大鼠BMSCs内持续表达的时间.方法:贴壁培养法分离、扩增大鼠BMSCs.用带有eGFP基因的Ad5/F35(Ad5/F35-eGFP)分别以1、10、100、1000的感染复数(MOI)转染第2代大鼠BMSCs;荧光倒置显微镜和流式细胞仪(FCM)检测eGFP基因的转染效率与表达水平,观察细胞生长状态以评估病毒对大鼠BMSCs基本生物学特性的影响;对MOI=100的病毒转染的大鼠BMSCs在转染后第2、7、14、21、30天分别用FCM检测大鼠BMSCs内eGFP的表达情况.结果:MOI在1到1000范围内,eGFP基因转染效率和表达水平与Ad5/F35-eGFP的MOI呈正向剂量相关性.MOI=100的病毒可转染90%左右的大鼠BMSCs,且eGFP基因在1个月内均有表达.MOI为1、10、100的病毒不影响大鼠BMSCs的活力和增殖能力.结论:Ad5/F35可以高效地将eGFP基因体外转染大鼠BMSCs,eGFP基因可持续表达1个月.本研究为Ad5/F35作为BMSCs的基因转移和表达载体进行细胞治疗与基因治疗提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘英	东南大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系	25	147	7.0	11.0
2	李建勇	南京医科大学第一附属医院血液科	273	1044	13.0	17.0
3	毛曦	东南大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系	12	154	4.0	12.0
4	杨鎏	东南大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系	4	9	2.0	2.0