运用PCR-DGGE技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的初步研究

• 作者: 李成荣 李长钢 王缨 石红松 赵维玲 陈小文 陈运生
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏 变性梯度凝胶电泳 基因测序 突变
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 529-532
• 页数: 4页
• 分类号: R556.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8830.2007.06.003

摘要

目的 运用多聚酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏患者及基因携带者基因变异,探讨其对该病的诊断和研究价值.方法 提取G-6-PD缺乏症患者及其家系(患者父亲和/或母亲等)的外周血RNA,逆转录合成cDNA后,选取第11至12外显子部分cDNA片段进行PCR-DGGE,观察其电泳行为,将电泳行为异常的标本进行基因测序,最后做出基因诊断.结果 36个家系中33个家系发现G-6-PD基因在1304至1520片段出现PCR-DGGE多种异常电泳区带.9例母亲G-6-PD/6-PGD比值低于1.00,其中3例比值低于0.50,而且PCR-DGGE电泳行为一致,基因测序发现为双重杂合子;比值正常的G-6-PD缺乏基因携带者母亲均为单杂合子.该片段基因测序发现3个突变位点分别为:C1311T,G1376T,G1388A.各基因突变的位点有其特殊的电泳行为.结论 PCR-DGGE技术是一种敏感性高、可靠性强的筛查基因突变的方法.在临床研究G-6-PD缺乏,特别是常规诊断技术不能发现的女性G-6-PD缺乏基因携带者的检测中具有很强的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李成荣	深圳市儿童医院儿研所	139	1029	15.0	24.0
2	李长钢	深圳市儿童医院内科	76	382	9.0	16.0
3	赵维玲	深圳市儿童医院内科	29	147	6.0	11.0
4	陈小文	深圳市儿童医院儿研所	42	282	8.0	14.0
5	王缨	深圳市儿童医院内科	23	164	7.0	11.0
6	石红松	深圳市儿童医院内科	21	76	5.0	7.0
7	陈运生	深圳市儿童医院检验科	53	240	9.0	12.0