H9N2型禽流感病毒核蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 刘梅 李自力 毕丁仁 肖运才 胡思顺 许青荣
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 禽流感病毒 核蛋白 融合表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 939-941
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3345字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.06.015

摘要

目的:利用大肠杆菌表达H9N2禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)与GST的融合蛋白并分离纯化,进行动物免疫制备多克隆抗体.方法:根据AIV NP基因序列设计引物,将已经获得的NP基因定向克隆到GST融合原核表达载体pGEX-KG并转化大肠杆菌,在IPTG诱导下获得高效表达.经谷胱甘肽层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫家兔,得到pGEX-KG-NP多克隆抗体.结果:SDS-PAGE分析显示融合表达蛋白GST-NP相对分子质量约82 000,表达量约占菌体总蛋白的20%.Western-blot和ELISA检测结果表明,重组NP能与鸡抗AIV抗体发生明显的抗原抗体反应.自制的多克隆抗体能特异地与NP相互作用,可用于AIV病原诊断.结论:获得了NP基因的高效表达产物;制备了效价和特异性良好的抗重组NP多克隆抗体.经实验验证表达产物具有活性,多克隆抗体效价高,特异性强,为AIV病原诊断试剂的研发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕丁仁	华中农业大学动物医学院	72	604	14.0	20.0
2	刘梅	华中农业大学动物医学院	24	233	9.0	14.0
3	李自力	华中农业大学动物医学院	31	337	11.0	17.0
4	肖运才	华中农业大学动物医学院	20	145	6.0	11.0
5	胡思顺	华中农业大学动物医学院	23	183	8.0	13.0
6	许青荣	华中农业大学动物医学院	26	201	7.0	14.0