人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

• 作者: 刘兴汉 张宇雯 李丹 李冀宏 栗亚 赵炜明 马洪星
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 内皮抑素 RGD序列 克隆 基因表达 抗肿瘤活性
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 475-479
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4211字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.06.002

摘要

目的 克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性.方法 人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽.通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性.结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、胃癌7901细胞(SGC-7901)半数抑制浓度IC50为36 μg/ml、47μg/ml,显著低于内皮抑素IC50179μg/ml、202 μg/ml.CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强.30肽在小鼠体内抑瘤率47.8%,效果优于内皮抑素28.7%.结论 30肽具有更强抗肿瘤活性,有可能成为治疗肿瘤的一种新药物.