人内皮抑素基因改造、表达、纯化及活性检测

• 作者: 刘兴汉 徐建永 林雪松 王淑静 赵炜明
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人内皮抑素 基因改造 DNA重组
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 409-412
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2005.06.003

摘要

目的克隆诱变的人内皮抑素(human endostatin,hES)氨基端基因,并检测其活性.方法双酶切已诱变的人内皮抑素基因,电泳回收氨基端片段,与质粒pTYB-2重组,转化E.coli BL-21(DE3).通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验,MTT实验,HE染色及流式细胞术检测重组小分子人内皮抑素对新生血管生成、细胞增殖和细胞凋亡的影响.结果基因重组小分子内皮抑素对鸡胚尿囊膜新生血管生成具有明显的抑制作用;对脐静脉内皮细胞和肝癌细胞增殖的抑制存在量效关系;作用24 h后,观察到细胞凋亡现象;与对照组相比,细胞凋亡数增加.结论成功构建了人内皮抑素氨基端基因工程菌,得到了具有生物活性的氨基端小分子内皮抑素,为便利临床应用奠定了基础.