5HRE强化的肝癌靶向性自杀基因载体的构建

• 作者: 周培华 孙学军 王燕 禄韶英
• 来源期刊: 中国普外基础与临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧反应元件 肝癌 自杀基因
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 163-167
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9424.2007.02.012

摘要

目的 设计并构建5个拷贝的缺氧反应元件(5HRE)增强子和甲胎蛋白启动子(AFPp)联合调控的自杀基因硝基还原酶(NTR)真核表达载体.方法 设计引物作重叠PCR从大肠杆菌中克隆融合有6个组胺酸基因标签(6his-tag)的自杀基因NTR,用合成的HRE寡核苷酸单链退火,多次重组克隆构建5HRE.将NTR基因、5HRE和AFPp与酶切去除了巨细胞病毒即刻早期启动子(Pcmv ie)的pIRES2-EGFP载体重组,构建携带5HRE、AFPp和NTR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR.结果 成功克隆了融合6his-tag的NTR基因,NTR基因与Genbank公布的序列一致.成功合成了5HRE,测序与预期相符.将上述片段和AFPp重组到去除了Pcmv ie的pIRES2-EGFP载体上,酶切鉴定和DNA序列分析无误.结论 成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-5HRE-AFPp-NTR,为下一步的体外实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙学军	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	116	617	12.0	19.0
2	禄韶英	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	59	385	10.0	17.0
3	王燕	第四军医大学唐都医院疼痛研究所	54	258	8.0	12.0
4	周培华	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	5	9	2.0	3.0