多次循环离子交换色谱纯化Cry1Ab蛋白及其肽质量谱图的分析

• 作者: 叶庆富 栾明明 邬建敏
• 来源期刊: 浙江大学学报（理学版）
• 学科: 化学
• 关键词: Cry1Ab蛋白 离子交换色谱 循环分离 肽质量谱图分析
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 化学
• 页码范围: 529-532,537
• 页数: 5页
• 分类号: O657.7
• 字数: 3698字
• 语种: 中文

摘要

采用Q-Sepharose FF离子交换柱对初步纯化的Cry1Ab杀虫蛋白样品进行了多次循环精细纯化,洗脱模式为离子强度台阶梯度,流动相为Tris-HCl缓冲液加NaCl,盐浓度从0.1 mol·L-1变化到1.0 mol·L-1.结果表明,Cry1Ab蛋白在NaCl浓度为0.4 mol·L-1时从柱上被洗脱,并与杂蛋白很好地分离.色谱分离机制符合顶替色谱机制.经3次循环分离后可获得高纯度的Cry1Ab蛋白.用SDS-PAGE分析了蛋白的纯度及表观分子量,电泳胶上分离的蛋白进行原位酶切后,用基质辅助激光解析-飞行时间质谱对纯化蛋白进行肽质量谱的分析,Mascot数据库搜索结果确证了该纯化蛋白酶解肽段80%符合已知的Cry1Ab蛋白特征肽段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶庆富	浙江大学核农所	62	1299	19.0	33.0
2	邬建敏	浙江大学化学系	23	299	9.0	17.0
3	栾明明	浙江大学化学系	2	11	2.0	2.0