人T-bet基因转染U937探讨T-bet对白血病细胞的影响

• 作者: 杨敏 王胜军 王锁英 许化溪 许小朋 邱谷风 邵启祥
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因转染 T-bet 干扰素γ U937
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 619-621,626
• 页数: 4页
• 分类号: R577
• 字数: 2650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2007.06.008

摘要

目的 探讨人T-bet基因在白血病细胞株U937中的表达及其对IFN-γ分泌的影响,寻求通过免疫调节改善白血病患者机体免疫状态的可能性.方法 采用电穿孔技术将重组人pIRES-eGFP-Tbet(pIRES-eGFP-hTbet)质粒转染U937细胞,RT-PCR检测转染前后U937细胞T-bet的mRNA水平;westen-blot检测表达的T-bet蛋白;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平.试验中同时设立pIRES-eGFP质粒为对照.结果 电穿孔转染U937细胞后,在荧光显微镜下观察到带荧光的细胞(转染细胞),其荧光细胞阳性率80%左右,提示转染成功;转染T-bet的U937细胞,分别经RT-PCR及westen-blot检测到T-bet的mRNA和表达的蛋白,而未经转染或转染对照质粒pIRES-eGFP的细胞,均未见目的基因的转录和蛋白表达;T-bet转染细胞的培养上清中含有较高水平的IFN-γ,而转染前及对照质粒转染的细胞IFN-γ的分泌水平极低.结论 通过电穿孔方法 成功将人T-bet基因转染到白血病细胞株U937中,并检测到大量IFN-γ的产生.T-bet是免疫应答调节的重要转录因子,对其研究将有助于进一步探讨T-bet基因或其表达产物作为Th1应答的调节剂用于临床血液病治疗的可能性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王锁英	江苏大学附属医院儿科	22	70	5.0	7.0
2	邵启祥	江苏大学检验医学研究所免疫学研究室	78	336	9.0	14.0
3	许化溪	江苏大学检验医学研究所免疫学研究室	148	745	13.0	19.0
4	王胜军	江苏大学检验医学研究所免疫学研究室	92	352	8.0	14.0
5	杨敏	江苏大学检验医学研究所免疫学研究室	9	39	4.0	6.0
6	许小朋	江苏大学检验医学研究所免疫学研究室	2	10	2.0	2.0
7	邱谷风	江苏大学检验医学研究所免疫学研究室	2	10	2.0	2.0