小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体的构建

• 作者: 刘然义 梁志慧 檀卫平 麦贤弟 黄嘉凌 黄必军 黄文林 黄绍良
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 T-bet基因 重组腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 546-548,553
• 页数: 4页
• 分类号: R511.8
• 字数: 2434字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2004.06.013

摘要

[目的] 构建小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体,为 T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的 T-bet生物表达系统.[方法] 采用内切酶从质粒 T-bet/GFP-RV中切获约 1.7 kb的小鼠 T-betcDNA片段,与穿梭质粒 pShuttle连接,再通过稀有酶切位点将含 T-betcDNA的表达盒与 Adeno-X腺病毒载体骨架连接,构建重组载体 pAdeno-T-bet,测序鉴定无错配及插入移位等 DNA顺序改变,并转染 HEK293细胞,出现 CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒 DNA行 PCR鉴定.[结果] PCR及酶切证实: T-betcDNA正确克隆到穿梭质粒 pShuttle中,带 T-betcDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组 E1A缺失区,并在 HEK293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒 pAdeno-T-bet.[结论]本实验成功构建了小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体,并在 HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄绍良	中山大学附属第二医院儿科	148	897	15.0	19.0
2	黄嘉凌	中山大学肿瘤研究所	10	40	4.0	6.0
3	檀卫平	中山大学附属第二医院儿科	72	406	11.0	15.0
4	麦贤弟	中山大学附属第二医院儿科	42	349	10.0	16.0
5	黄必军	中山大学肿瘤研究所	18	91	5.0	9.0
6	刘然义	中山大学肿瘤研究所	28	126	6.0	10.0
7	黄文林	中山大学肿瘤研究所	40	232	8.0	13.0
8	梁志慧	中山大学肿瘤研究所	1	4	1.0	1.0