猪Sirt5基因的克隆及其腺病毒载体的构建和鉴定

• 作者: 冯永达 卢志鹏 夏枫耿 明飞平 楚品品 肖安吉 谭家裕 黄瀚威 黄魁英
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 猪 Sirt5基因 重组 腺病毒
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-5
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

为了从猪脑中克隆得到Sirt5基因,并构建腺病毒载体,提取长白猪脑组织总RNA,利用RT-PCR和PCR扩增得到Sirt5基因.再将此基因克隆至穿梭载体上,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-IRES-Sirt5.经酶切线性化,电击转化已含骨架载体pAdEasy-1DNA的BJ5183+感受态菌,得到重组腺病毒质粒Ad-Sirt5.重组腺病毒质粒经酶切线性化鉴定.结果本试验获得的Sirt5基因与NCBI公布序列一致.利用细菌同源重组技术构建重组腺病毒载体,经酶切鉴定正确.表明本试验成功克隆得到Sirt5基因,并成功构建Sirt5基因的腺病毒载体.