RNA干扰沉默CTGF表达对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的影响

• 作者: 廖二元 彭依群 翟木绪 隋国良
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 小干扰RNA 结缔组织生长因子 Ⅰ型胶原 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 469-473
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4282字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2007.07.002

摘要

目的 本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG 63细胞中的表达,观察CTGF 降表达后对人成骨样MG 63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶mRNA表达的影响.方法 针对人CTGFmRNA 440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA 1、siRNA 2、siRNA 3);在阳离子脂质体介导下转染人成骨样MG 63细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,转染48 h后收集细胞.采用Northern杂交研究CTGF mRNA表达水平的改变,半定量RT-PCR观察Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的改变,Western blotting观察CTGF蛋白表达的变化.MTT法测定RNA干扰后人成骨样MG 63细胞活力的改变.结果 空白对照组相比,转染siRNA 1、mRNA 3的MG 63细胞CTGF mRNA和蛋白表达明显下调,转染siRNA 2及非特异性siRNA的MG 63细胞CTGF的表达无明显变化.转染siRNA 1、siRNA 3的MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达明显下调,细胞活力明显降低.结论 针对人CTGF mRNA设计、合成的siRNA可有效抑制人成骨样MG 63细胞CTGF的转录和表达;CTGF表达下调可抑制MG 63细胞表型标志物Ⅰ型胶原、ALP mRNA的表达,降低MG 63细胞活力,这说明CTGF可能在维持骨代谢平衡中具有重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	隋国良		12	78	6.0	8.0