抗HBV preS1嵌合抗体的真核表达及活性分析

• 作者: 夏宁邵 张军 林亦伟 王明桥 王晋 罗文新 陈瑛炜 顾颖
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 嵌合抗体 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 167-171
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4355字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-5101.2007.02.019

摘要

目的 通过真核系统表达抗HBV preS1嵌合抗体4D11并分析其活性.方法 通过RT-PCR方法从分泌抗乙型肝炎病毒preS1的鼠源单克隆抗体4D11的杂交瘤细胞中克隆出抗体基因的重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)序列,并分别克隆到含有人γ1重链和κ轻链恒定区序列的pcDNA3.1-AH和pcDNA3.1-Ak质粒中,共转染人胚肾细胞变种(293 FT)细胞.通过Western blot、竞争ELISA、阳性血清阻断及血清中preS1的检测实验来分析其活性.结果 轻重链基因在细胞内正确组装成嵌合抗体分子并分泌至细胞外,具有结合活性.嵌合抗体可以很好的与病毒preS1结合,对阳性血清的检测效果与鼠单抗一致.结论 成功的利用293 FT细胞表达了4D11嵌合抗体,抗体保留了原鼠单抗的特异性和活性,为探讨乙肝抗体的治疗提供了试验资料.