山羊痘病毒温度敏感株基因组DNA复制非必需区的筛选

• 作者: 吴国华 张强 才学鹏 施程洪 朱彩珠 朱海霞 李健 谢芳 鞠厚斌 韩若婵 颜新敏
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊痘病毒 非必需区 基因克隆 序列分析 转染
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 737-741
• 页数: 5页
• 分类号: S852.654
• 字数: 4032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.09.003

摘要

提取山羊痘病毒温度敏感株基因组DNA,用Hind Ⅲ酶切,随机克隆到pUC18质粒中,限制性内切酶片段电泳分析和序列测定结果表明,克隆到4个不同大小的Hind Ⅲ片段pUA、pUB、pUC和pUD.随后,将它们和羊痘病毒Pellor(AY077835)株进行了同源性比较,发现核苷酸同源性为90.O%～94.5%,氨基酸同源性为83.0%～91.4%.选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点,插入P11P7.5-LacZ报告基因,构建了pUA1、pUB1、pUC1和pUD1共4个重组载体质粒.通过脂质体分别转染山羊痘病毒感染的BHK-21细胞,在X-gal存在条件下经蓝白斑筛选重组病毒,获得1株重组病毒,证明筛选出了1个复制非必需区片段.