蛋白激酶B短发夹环RNA表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖活性的影响

• 作者: 于维东 张强 杨军 胡新华 范红杰
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 血管平滑肌细胞 增殖活性 蛋白激酶B 表达载体 短发夹环RNA RNA干扰
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 721-724
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 3724字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2007.10.001

摘要

目的 构建靶向蛋白激酶B基因的短发夹环RNA表达载体,观察其对血管平滑肌细胞增殖活性的影响.方法 设计多个针对大鼠蛋白激酶B基因的短发夹环RNA序列,化学合成方法合成并经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA序列插入逆转录病毒载体pLXIN,包装后获得蛋白激酶B的逆转录表达载体,感染血管平滑肌细胞,Northern blot和Western blot法检测蛋白激酶B及其下游底物的表达变化,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测血管平滑肌细胞增殖活性的改变.结果 成功构建蛋白激酶B基因的逆转录病毒载体并包装,感染血管平滑肌细胞,证实其能显著抑制蛋白激酶B的mRNA和蛋白产物表达,下游的p70s6k表达相应减少;被感染血管平滑肌细胞的分裂、增殖过程受阻,更多细胞停滞在G0/G1期.结论 成功构建蛋白激酶B基因逆转录病毒RNA干扰表达载体,感染血管平滑肌细胞能够明显抑制其分裂、分化和增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨军	中国医科大学附属第一医院外科	398	1853	18.0	26.0
2	胡新华	中国医科大学附属第一医院外科	58	302	9.0	14.0
3	张强	中国医科大学附属第一医院外科	150	996	12.0	26.0
4	范红杰	中国医科大学附属盛京医院神经内科	22	157	7.0	12.0