猪细小病毒PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 付瑞 吴淑芳 贺争鸣 邢瑞昌
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 PCR 特异性 敏感性
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 292-295
• 页数: 4页
• 分类号: S858.28
• 字数: 2927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.04.019

摘要

目的 建立猪细小病毒(PPV)PCR检测方法.方法 设计一对针对PPV的特异引物,经方阵滴定法确定PCR检测的最佳条件,以多种病毒DNA为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行斑点杂交鉴定.提取已知滴度的病毒培养物DNA为模板,稀释后进行PCR扩增,测定PCR方法的敏感性.采用此方法检测了180份猪各种组织样品的DNA及PPV-猪组织混合感染PK-15细胞模型.结果 仅PPV野毒株和北京分离株AV7909能够扩增出一条531 bp的片段,测序结果证明为PPV的特异片段.该方法所能检测的最小病毒滴度值为0.398 TCID50,可以检测出PPV-猪组织混合感染PK-15细胞模型中0.500 TCID50的感染量.180份组织样品均未检出PPV.结论 该方法具有良好的特异性和敏感性.