双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定

• 作者: Picardeau M 冯春燕 杨杨 董珂 郭晓奎 钟怡
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 双曲钩端螺旋体 溶血素 tlyA基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 739-744
• 页数: 6页
• 分类号: R377.5
• 字数: 4667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.08.001

摘要

目的 研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性.方法 对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b(+),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定.同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况.另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测.结果 双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene).原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环.以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性.结论 未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董珂	上海交通大学医学院病原生物学教研室	7	7	2.0	2.0
2	杨杨	上海交通大学医学院病原生物学教研室	15	46	4.0	6.0
3	钟怡	上海交通大学医学院病原生物学教研室	4	5	2.0	2.0
4	冯春燕	上海交通大学医学院病原生物学教研室	3	6	2.0	2.0