抗结核分枝杆菌38kD抗原单克隆抗体的制备及荧光抗体检测方法的建立

• 作者: 万康林 刘志广 张媛媛 赵秀芹 阳波 魏云芳
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 单克隆抗体 直接免疫荧光检测
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 459-461,473
• 页数: 4页
• 分类号: R378.91
• 字数: 2016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.05.009

摘要

目的 制备抗结核分枝杆菌单克隆抗体,经纯化后标记荧光素,建立直接免疫荧光法用于痰标本的结核分枝杆菌检测.方法 常规方法制备单克隆抗体.ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,用免疫印迹法确认.单克隆抗体采用饱和硫酸铵粗提和Sephadex G-50层析纯化.单抗纯化后采用直接法标记异硫氰酸荧光素,标记后的荧光抗体用于临床痰涂片结核分枝杆菌的检测.结果 经筛选获得4株单克隆抗体杂交瘤细胞株.ELISA检测小鼠腹水单克隆抗体效价达到1:6 400-1:12 800.免疫印迹实验表明4株单抗均为抗结核分枝杆菌38 kDa蛋白单抗,其中两株产生较强的免疫反应条带.采用异硫氰酸荧光素标记纯化的单抗,建立直接免疫荧光检测法,对41份结核病患者的痰标本进行检测,阳性率为90.24%,与抗酸染色法比较,直接荧光检测法敏感性显著高于抗酸染色法(P＜0.05).结论 应用抗结核分枝杆菌38kDa蛋白的单克隆抗体,建立直接免疫荧光检测法,应用于临床痰标本结核分枝杆菌检测,对于辅助诊断结核病具有一定价值

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵秀芹	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	3	20	2.0	3.0
2	魏云芳		43	126	5.0	8.0
3	万康林		6	36	3.0	6.0
4	刘志广	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	2	15	2.0	2.0
5	张媛媛	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	3	1.0	1.0
6	阳波	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	3	1.0	1.0