NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区的表达及纯化

• 作者: 周勇 孙红琰 崔玉 彭剑淳 李晖 王全立 詹林盛
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NK细胞免疫球蛋白样受体 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 943-945,960
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.09.016

摘要

目的 表达并纯化NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区.方法 以pUC57-KIR3DL1为模板,PCR扩增KIR3DL1胞外区序列,与pGEM-T载体进行A-T克隆;测序正确后,采用定向克隆的方法将KIR3DL11胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建了pET28a-DsbA/KIR3DL1重组质粒.将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DL1融合蛋白表达,溶解于8mol/L尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Superdex 75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和Western blot鉴定目的 蛋白的表达及纯化.结果 表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度95%以上的DsbA-KIR3DS1融合蛋白.结论 KIR3DL1胞外区的成功表达及纯化为进一步研究KIR3DL1与相应配体之间的相互作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙红琰	军事医学科学院野战输血研究所一室	20	155	8.0	12.0
2	王全立	军事医学科学院附属医院输血科	126	899	16.0	25.0
3	詹林盛	军事医学科学院野战输血研究所一室	64	450	11.0	19.0
4	周勇	军事医学科学院野战输血研究所一室	27	103	6.0	9.0
5	彭剑淳	军事医学科学院野战输血研究所一室	23	345	8.0	18.0
6	崔玉	军事医学科学院野战输血研究所一室	3	9	2.0	3.0