乙型肝炎病毒L蛋白颗粒的真核表达与纯化

• 作者: 易继林 曾建平 杨志芳
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 COS-7细胞系 重组质粒 超速离心 酶联免疫吸附试验 L蛋白 免疫印迹 透射电镜
• 年，卷（期）: 2007,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1995-1999
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.18.004

摘要

目的:真核细胞中表达和纯化乙肝病毒L蛋白颗粒,并初步分析其物理特性与抗原性.方法:真核表达质粒pSVsigLM-S-瞬时转染COS-7细胞,收集48 h后的培养上清采用CsCl等密度平衡离心、蔗糖密度梯度超速离心和酶联免疫吸附试验(ELISA)3者结合的方法纯化L蛋白,获得的纯化产物行Western blotting 鉴定和透射电镜(TEM)观察.结果:采用超速离心结合ELISA法可以纯化L蛋白,CsCl等密度平衡离心显示在密度约1.21 g/cm3处富含S抗原性.SDS-PAGE证实产物主要由一种42 kDa的蛋白分子组成,Western blotting证实这种蛋白为同时具有S与PreS1抗原性的L蛋白.透射电镜显示分泌的L蛋白自行组装成约23 nm的球形颗粒.结论:融合外源性信号肽能有效的引导L蛋白的组装和分泌.CsCl和蔗糖超速离心能高效纯化L颗粒并保持其完整的抗原性及颗粒形态.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易继林	华中科技大学同济医学院附属同济医院普通外科	115	637	12.0	17.0
2	曾建平	中国人民解放军总医院肝胆外科	5	22	3.0	4.0
3	杨志芳	华中科技大学同济医学院附属同济医院普通外科	20	106	7.0	9.0