小鼠Cdc25B融合蛋白构建和表达

• 作者: 于秉治 张哲 滕秋艳 赵鸿梅
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: Cdc25B 基因表达 谷胱甘肽转移酶(GST) 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 976-977
• 页数: 2页
• 分类号: R329
• 字数: 1735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-0580.2007.08.037

摘要

目的 研究小鼠N末端缺失286氨基酸的野生型Cdc25B原核表达载体的构建和表达.方法 应用Primer5.0软件分析并设计小鼠Cdc25B5'及3'端引物(N末端缺失286氨基酶),化学合成并用聚合酶链反就(PCR)方法扩增,经限制性内切酶酶切后连接原核表达载体PGEX4T-2,构建成PGEX4T-2-Cdc25B融合表达载体,转化大肠埃希菌BL21后,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导进行目的蛋白表达.结果 通过双酶切、电泳分析及测序证明成功构建了Cdc25B融合表达载体,融合蛋白产物经蛋白印迹(Western blot)显示,相对分子量为53KD的蛋白谱带,与预期一致.结论 成功构建并表达了Cdc25B-N末端缺失的基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为近一步研究Cdc25B的功能提供基础依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵鸿梅	辽宁省人民医院检验科	22	58	4.0	6.0
5	滕秋艳	中国医科大学生化与分子生物学教研室	1	3	1.0	1.0
6	张哲	辽宁省人民医院检验科	1	3	1.0	1.0
7	于秉治	辽宁省人民医院检验科	1	3	1.0	1.0