小鼠Cdc25 B基因的真核表达载体构建及鉴定

• 作者: 刘岚清 周晓敏 孟峻
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 真核表达载体 Cdc25B HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1112-1115
• 页数: 4页
• 分类号: Q593
• 字数: 2894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2019.08.016

摘要

目的 构建含有小鼠Cdc25B基因的真核表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B,并观察和验证其在真核细胞中的表达.方法 目的基因Cdc25B经化学合成后,定向克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体中,经过限制性内切酶KpnⅠ和ApaⅠ进行双酶切和测序鉴定,构建真核表达载体pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B,应用脂质体法转染HEK293细胞,通过Western blot检测细胞内Cdc25B的表达.结果 pcDNA3.1-3xflag-Cdc25B真核表达载体构建成功,将其转染HEK293细胞48 h,提取细胞蛋白,利用Western blot检测到细胞内Cdc25B的表达,并且测序结果与预期结果一致.结论 成功构建了真核表达载体pcD-NA3.1-3xflag-Cdc25B.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟峻	内蒙古医科大学附属医院检验科	30	109	7.0	8.0
2	周晓敏	内蒙古医科大学附属医院临床检验诊断学教研室	3	0	0.0	0.0
3	刘岚清	内蒙古医科大学附属医院临床检验诊断学教研室	3	0	0.0	0.0