PAI siRNA表达载体的构建及鉴定

• 作者: 张静菊 杜建时 王嘉桔 赵晴
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 纤溶酶原激活物抑制剂-1 小干扰RNA(siRNA) 发卡样小干扰RNA HpG2
• 年，卷（期）: 2007,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1439-1441
• 页数: 3页
• 分类号: R457.2
• 字数: 1701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2007.15.003

摘要

目的 构建和鉴定针对PAI 的发卡样小干扰RNA(siRNA)真核表达载体PAI siRNA.方法 人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAI siRNA 的寡核苷酸链, 将其插入到pSilencerTM 2.1-U6 neo 载体中,经测序鉴定所构建的重组载体是否正确;采用电转染法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中, 采用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 、West ern印迹法分别检测转染细胞PAI mRNA 和蛋白的表达.结果 经测序证明PAI siRNA 序列正确;转染PAI siRNA 载体后,HpG2细胞PAI mRNA 和蛋白表达均较对照组明显下降(P ＜0.01).结论 测序结果表明发卡样PAI siRNA 真核表达载体构建成功,转染Hp G2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PAI的表达, 为进一步研究PAI siRNA 载体提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张静菊	吉林大学中日联谊医院血管外科	15	79	3.0	8.0
2	王嘉桔	吉林大学中日联谊医院血管外科	30	177	8.0	12.0
3	杜建时	吉林大学中日联谊医院血管外科	60	324	11.0	15.0
4	赵晴	吉林大学中日联谊医院神经内科	60	420	11.0	18.0