不同启动子指导的HSV1-sr39TK/GCV系统对小鼠淋巴细胞的敏感性研究

• 作者: 徐开林 杜冰 潘秀英 高飞 鹿群先
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 丙氧鸟苷 单纯疱疹病毒I型胸苷激酶 淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 124-128
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 4318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.02.007

摘要

目的 观察慢病毒载体中不同启动子指导的突变型单纯疱疹病毒1型胸苷激酶(HSVl-sr39TK)基因在小鼠T淋巴细胞内的表达差异,并进一步比较对丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)的敏感性.方法 用亚克隆技术将PCR扩增的HSV1-sr39TK基因分别连接至慢病毒载体不同启动子后,然后在HSV1-sr39TK基因后以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry sites, IRES)连接绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)报告基因;采用三质粒包装系统包装病毒,将病毒感染刀豆蛋白A(concanavalin, ConA)激活的小鼠淋巴细胞,分别用流式细胞术、RT-PCR法鉴定HSV1-sr39TK和GFP基因在小鼠淋巴细胞的表达,用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法观察感染不同病毒的淋巴细胞对前体药物GCV的敏感性.结果 不同启动子指导的HSV1-sr39TK及GFP基因均可在小鼠淋巴细胞表达,巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)启动子驱动表达能力最强,磷酸甘油激酶(phosphoglycerokinase, PGK)启动子最弱.感染含CMV启动子病毒的淋巴细胞对GCV的IC50值最小.结论 在小鼠淋巴细胞内CMV启动子驱动的慢病毒载体HSV1-sr39TK基因表达最强,对前体药物GCV敏感性最高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘秀英	徐州医学院附属医院血液科	123	539	10.0	18.0
2	鹿群先	徐州医学院附属医院血液科	68	283	8.0	13.0
3	徐开林	徐州医学院附属医院血液科	207	750	11.0	19.0
4	杜冰	徐州医学院附属医院血液科	33	96	6.0	8.0
5	高飞	徐州医学院附属医院血液科	5	32	2.0	5.0