水稻种子萌发期高压诱导的SSH-cDNA文库构建与分析

• 作者: 刘勋成 张美 段俊
• 来源期刊: 高压物理学报
• 关键词: 高压 抑制差减杂交 水稻
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 370-376
• 页数: 7页
• 分类号: O521.21
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5773.2008.04.006

摘要

为了研究高压处理对高等植物基因表达的影响,以萌发过程中经高压处理后的水稻种子的mRNA作为检测子(Tester),以对照样品的mRNA作为驱动子(Driver),采用抑制差减杂交(SSH)结合镜像选择技术(MOS)构建了高压处理后水稻种子萌发过程中诱导表达的差减cDNA文库,并通过蓝白斑筛选获得了580个重组克隆.菌液PCR检测结果表明,这些克隆中的插入片段的大小主要分布在200～1000 bp之间,平均大小约为575 bp,其中单一扩增条带的有效重组克隆数为542个,有效的重组克隆率为93.3%.对部分重组克隆进行测序发现,受高压诱导表达的基因主要涉及到代谢、胁迫响应、转录调控等方面.为高压处理后水稻种子基因表达模式变化的研究打下了基础.