人线粒体DNA荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 李建远 王学波
• 来源期刊: 生物医学工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: SYBR Green I 荧光定量PCR 线粒体DNA 聚合酶链反应 人
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 298-301
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 2624字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6278.2008.04.018

摘要

建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人线粒体DNA的方法.选取人线粒体DNA高度保守基因片段,将该基因片段与pCF-T载体连接后,转化入E.coli DH5a,提取重组质粒PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR-Green I荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线.结果表明:构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含101～108拷贝时,扩增反应CT值与拷贝数的对数成线性关系),相关系数为0.997.批内和批间重复性测定的变异系数分别为1.23%～3.29%以及3.10%～5.21%.我们成功建立了实时荧光定量PCR检测人线粒体DNA的方法,该方法可作为进一步研究线粒体DNA的方法,在相关疾病诊断和监测中具有一定的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王学波	青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院中心实验室	8	37	4.0	6.0
2	李建远	青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院中心实验室	17	64	6.0	7.0