人乳头瘤病毒16型L1-E7c嵌合基因的构建表达及免疫学效应的研究

• 作者: 刘世德 刘朝奇 司静懿 徐建青 李昆 许雪帮
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 L1 E7 蛋白表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 254-258
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2008.03.002

摘要

目的 构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1-ETc嵌合基因并表达融合蛋白,以期获得防治HPV16感染及相关肿瘤的疫苗.方法 以HPV16型的中国人野毒株为模板,利用PCR克隆技术制备HPV16 L1-E7c嵌合基因,并转入原核表达载体pET28a(+),获得pET28a(+)-L1-E7c表达质粒.以Western blot方法鉴定融合蛋白与HPV16 L1和E7抗体的特异性结合.应用蛋白纯化仪纯化HPV16 L1-E7c融合蛋白,经过复性后,电镜观察病毒样颗粒(cVLP)的形态结构.纯化的蛋白免疫动物,测定疫苗抗肿瘤的细胞免疫及抗体产生情况.结果 经过序列分析和酶切鉴定表明成功构建了HPV16L1-E7c嵌合基因,并在大肠杆菌中可高效表达L1-E7c融合蛋白.此融合蛋白具有HPV16 L1和E7的抗原性,纯化的蛋白复性后可形成嵌合病毒样颗粒(cVLP),纯化的蛋白免疫动物后,产生特异性细胞和体液免疫反应,具有抗肿瘤活性.结论 构建的嵌合基因HPV16L1-E7c可有效表达HPV16 L1-E7c重组蛋白并形成cVLP.此蛋白在动物实验中具有疫苗的免疫保护作用,为HPV16疫苗的研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘朝奇	三峡大学分子生物学研究所	171	552	10.0	15.0
2	许雪帮	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	1	2	1.0	1.0
3	徐建青	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	7	68	3.0	7.0
4	李昆	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	6	20	3.0	4.0
5	司静懿	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	10	42	3.0	6.0
6	刘世德	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	4	10	2.0	3.0