人乳头瘤病毒16型E7基因原核表达载体的构建及表达

• 作者: 史红艳 孙延波 徐丽娟 温剑平
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 聚合酶链式反应 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 661-664
• 分类号: R349.64
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV-16)E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达.方法:人工合成HPV16 E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16 E7基因,并克隆至pGEX-4T1原核表达载体,构建重组表达载体pGEX-4T1-HPV16-E7.将其转化到工程菌Rosetta后,经IPTG诱导表达,进行E7-GST融合蛋白的SDS-PAGE分析和Ni2+-NTA亲和层析纯化.结果:E7基因PCR扩增产物和重组表达质粒的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见300 bp的目的基因条带.表达的重组蛋白经SDSPAGE电泳和纯化后,在相对分子质量约36 000处有特异性表达带,与预期相符.结论:在原核系统中含E7基因的重组质粒可有效表达E7-GST融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙延波	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	55	163	7.0	8.0
2	史红艳	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	35	116	5.0	9.0
3	温剑平	吉林大学白求恩医学院分子生物学系	16	47	4.0	6.0
4	徐丽娟	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	6	17	2.0	4.0