人乳头瘤病毒16型E6蛋白真核表达载体的构建及表达

• 作者: 万艳平 余敏君 王鑫 王静 蒋永林
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 早期蛋白6 真核表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 505-508
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2930字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2006.04.009

摘要

目的 构建在哺乳动物细胞中表达的人乳头瘤病毒16型早期蛋白6真核表达载体pcDNA3.1(-)/E6,为研究HPV16 E6蛋白在细胞永生化作用中的机制奠定实验基础.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增E6基因.将PCR产物纯化后与pUCm-T载体连接,经蓝白斑筛选、双酶切鉴定及序列分析后,亚克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中;阳性克隆经双酶切鉴定后转染RAW264.7巨噬细胞,Western blotting鉴定其在RAW264.7细胞中的表达.结果 重组载体经酶切、PCR及测序证明插入片断序列正确无误,转染RAW264.7细胞后可在细胞中表达HPV16 E6蛋白.结论 成功构建的HPV16 E6真核表达载体pcDNA3.1(-)/E6能在RAW264.7细胞中表达E6蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋永林		1	5	1.0	1.0
2	王静		1	5	1.0	1.0
3	王鑫		1	5	1.0	1.0
4	余敏君		2	10	2.0	2.0
5	万艳平		1	5	1.0	1.0