人乳头瘤病毒16型E5蛋白真核载体的构建及表达

• 作者: 唐双阳 屈巾力 李薇 苏贤 许骞 陈熙 龙敏芝
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型(HPV16) E5 表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 501-503,506
• 分类号: R37
• 字数: 2585字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2011.05.006

摘要

目的 构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E5蛋白真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E5,分析E5在HeLa细胞及BALB/c小鼠肌肉组织中的表达.方法 设计HPV16 E5基因引物,PCR扩增E5基因,经BamHI、EcoRI酶切后将其连接入pcDNA3.1(+),PCR及双酶切筛选阳性克隆并测序.将构建的pcDNA3.1(+)/HPV16 E5转染HeLa细胞,利用RT-PCR测定HPV16 E5 mRNA表达.将6只BALB/c小鼠分为3组,分别取100 mg pcDNA3.1(+)/HPV16 E5、100 mg pcDNA3.1(+)、100 mL PBS经肌肉注射小鼠,2周1次,共4次；末次接种后第14天取小鼠股四头肌制成石蜡切片,免疫组织化学法检测E5蛋白在小鼠肌肉组织中的表达.结果 PCR扩增得到252 bp HPV16E5基因片段,DNA测序结果显示E5基因片段正确地连入pcDNA3.1(+).构建的pcDNA3.1(+)/HPV16 E5在HeLa细胞表达大小为252bp的HPV16 E5 mRNA.小鼠股四头肌细胞膜被染成棕黄色.结论 构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E5能在HeLa细胞及小鼠肌肉组织中表达HPV16 E5蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐双阳	南华大学病原生物学研究所	71	348	11.0	15.0
2	陈熙	南华大学船山学院	57	251	8.0	13.0
6	李薇	南华大学病原生物学研究所	6	17	3.0	3.0
7	屈巾力	南华大学船山学院	2	4	1.0	2.0
8	龙敏芝	南华大学船山学院	6	4	1.0	2.0
9	苏贤	南华大学船山学院	4	8	2.0	2.0
10	许骞	南华大学船山学院	1	1	1.0	1.0