shRNA沉默PLCε基因表达对肾癌细胞增殖的抑制及作用机制

• 作者: 冀慧莹 吕纯芳 罗春丽 苟春华 谢建红 郭永灿
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肾细胞 基因沉默 磷脂酶C 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 916-920
• 页数: 5页
• 分类号: R737.11
• 字数: 4095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2008.11.002

摘要

目的:探讨经短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默磷脂酶Cε(phospholipase C epsilon,PLCε)基因表达后对肾癌786-0细胞增殖的抑制及其作用机制.方法:脂质体介导重组质粒(pGenesil-PLCε)和空质粒(pGenesil-NP)转染786-0细胞48 h后,RT-PCR检测PLCε mRNA的表达;MTT法检测转染24、48和72 h后细胞增殖的抑制率;转染48 h后采用FCM方法分析细胞周期;RT-PCR和免疫细胞化学法分析转染48 h后p27和Ki67的表达情况.结果:转染重组质粒后可明显抑制PLCεmRNA的表达,其抑制率为69.7%;转染24、48和72 h后细胞增殖抑制率分别为21.2%,31.6%和32.7%;FCM结果显示转染重组质粒后细胞周期的分布发生了改变,G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞阻滞于G0/G1期,并出现了亚二倍体"凋亡峰".RT-PCR和免疫细胞化学结果均表明p27表达上调,而Ki67表达下调.结论:RNA干扰技术阻断PLCε基因表达后可抑制肾癌786-0细胞增殖,其作用机制可能是诱导p27表达上调和Ki67表达下调.