S1P1受体ERY保守基序突变对FTY720诱导其内化的影响

• 作者: 任碧轩 唐恩洁 敬保迁 杨健 胡为民
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 1型1-磷酸鞘氨醇受体 FTY720 流式细胞术 内化 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 214-218
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3527字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2008.03.008

摘要

1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)是淋巴细胞表面的重要受体.为研究S1P1中ERY保守基序与FTY720诱导其内化的关系.以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板,应用重叠PCR的方法,将S1P1第142位的Arg(R)突变为Asn(N),连同N端HA标签一起,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体.同时PCR扩增野生型S1P1,克隆人pcDNA3·1(+)中.限制性酶切消化、PCR和测序鉴定后,经Polyfect转染入HEK293细胞.G418筛选出稳定细胞株.100 nmol/LFTY720处理12 h后,抗HA-PE抗体染色,用流式细胞仪检测S1P1在HEK293细胞上的表达情况.结果显示HA-S1P1(WT)-pcDNA3.1(+)和HA-S1P1(R142N)-pcDNA3.1(+)载体被成功构建,HA-S1P1(WT)和HA-S1P1(R142N)蛋白表达在HEK293稳定细胞株的表面.FTY720能诱导HA-S1P1(WT)内化,但不能诱导HA-S1P1(R142N)内化.提示FTY720诱导S1P1内化与ERY保守基序有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨健	川北医学院微生物学与免疫学教研室	46	93	5.0	7.0
2	敬保迁	川北医学院免疫学与分子生物学研究所	46	116	5.0	8.0
3	唐恩洁	川北医学院微生物学与免疫学教研室	57	248	9.0	13.0
7	胡为民	川北医学院微生物学与免疫学教研室	35	80	5.0	6.0
11	任碧轩	川北医学院免疫学与分子生物学研究所	22	81	5.0	8.0