孔石莼凝集素蛋白基因的克隆与表达

• 作者: 吴祖建 姚锦爱 林奇英 谢联辉 谢荔岩 郑璐平 钟伏弟
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 孔石莼 凝集素 cDNA 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 762-767
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3745字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2008.06.011

摘要

根据孔石莼(Ulva pertusa)凝集素(Lectin)蛋白cDNA全长序列(GenBank登录号:AY433960)设计引物,以其总DNA为模板,采用PCR技术扩增蛋白DNA序列,经克隆、测序获得基基因序列.结果表明,孔石莼凝集素蛋白(UPL)基因序列长约为670 bp,含有一个大小为56 bp的内含子.此外,设计带酶切位点的引物,以UPL-cDNA为模板,扩增其开放阅读框,并与表达载体pGEX-2T连接,构建原核表达载体pG2T-UPL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达大小约为47 kD的目的蛋白.