黄瓜霜霉菌ITS区序列分析反应体系的构建及优化

• 作者: 刘艳玲 周秀艳 张艳菊 秦智伟 蔡宁
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜霜霉病茵 ITS区序列分析 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 园艺科学
• 页码范围: 25-30
• 页数: 6页
• 分类号: S436.421
• 字数: 3406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2008.08.006

摘要

文章以黄瓜霜霉茵为材料,采用改良的CTAB方法提取基因组DNA,研究了黄瓜霜霉茵ITS区序列分析中PCR反应体系的各主要成分对检测结果的影响,确立了适宜的退火温度和反应体系.优化后的反应体系(25μL)为:采用引物ITS1/ITS4各40 μg,60 ng DNA模板,2.5 mmol·L-4 Mg2+2.0μL,2.5 mmol·L-1dNTP 1.5μL,Taq酶1 U.优化的PCR扩增程序为:94℃预变性3 min,94℃50 s,52.2℃40s,72℃1.5 min.在这一条件下运行35个循环;72℃延伸7min.采用此反应体系和扩增程序,对采自黑龙江省不同地区的31份黄瓜霜霉菌基因组DNA进行PCR扩增,均可得到一条约为900 bp的条带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周秀艳	东北农业大学园艺学院	111	1188	17.0	28.0
2	秦智伟	东北农业大学园艺学院	170	2065	23.0	34.0
3	张艳菊	东北农业大学园艺学院	67	408	12.0	17.0
4	蔡宁	东北农业大学园艺学院	3	64	2.0	3.0
5	刘艳玲	东北农业大学园艺学院	4	47	2.0	4.0