siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用

• 作者: 刘红涛 宋敏 田芳 薛乐勋 许培荣
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 食管鳞癌 核因子-κB RNA干扰 5-FU Bcl-2
• 年，卷（期）: 2008,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1716-1721
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 5532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2008.16.002

摘要

目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响.方法:将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中,通过RTPCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平.Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达,Annexin V/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡,显微镜下观察p65 siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响.结果:EC9706和Eca109细胞转染p65 siRNA 24、48和72 h后,p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调,在72 h的阻断效率最为明显,与0 h相比,差异有显著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05,0.1±0.01 vs 0.38±0.04,均P<0.05),转染72 h后,p65和Bcl-2蛋白表达水平下调.EC9706和Eca109转染p65siRNA后,细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%,8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%,均P<0.05);p65 siRNA转染72 h后,EC9706和Eca109细胞增殖较慢;当p65 siRNA与5-FU联合作用,细胞增殖明显受到抑制.结论:p65 siRNA可阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,表明活化的NF-κB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛乐勋	郑州大学细胞生物学研究室	140	1187	18.0	26.0
2	宋敏	郑州大学第一附属医院肿瘤科	42	159	6.0	11.0
3	刘红涛	郑州大学细胞生物学研究室	60	431	11.0	18.0
4	田芳	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	39	168	8.0	11.0
8	许培荣	郑州大学细胞生物学研究室	40	265	11.0	15.0