STAT3 RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响

• 作者: 丛悦 张军权 李峰生 毛秉智 王治东 董波 陈肖华 饶亚岚 高玲
• 来源期刊: 中华放射医学与防护杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 转录激活因子3 U251细胞
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3060字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2008.01.005

摘要

目的 构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测联合60Co γ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用.方法 设计、合成STAT3特异性的19 bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilence2.1-U6-H1载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体,Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量.结果 经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2.1-STAT3表达载体,转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3蛋白的表达水平;确定2 Gy为放疗剂量.转染pSilence2.1-STAT3,细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低(P＜0.05),联合60Co γ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低(P＜0.05).结论 运用pSilence2.1-U6-H1载体构建的pSilence2.1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖;联合2 Gy 60Co γ射线照射可增加抑制效果.