抗人血管内皮细胞膜蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 周翠兰 廖端芳 涂剑 郭玉 郭紫芬 陈成立
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 药理学 单克隆抗体 血管内皮细胞 膜蛋白 制备 鉴定
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 685-688
• 页数: 4页
• 分类号: R96
• 语种: 中文

摘要

目的 研制特异性抗人血管内皮细胞膜蛋白的单克隆抗体,为深入研究血管内皮细胞的功能及血管内皮细胞与疾病的关系提供基础.方法 以血管内皮细胞株为免疫原直接免疫Balb/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,通过细胞酶联免疫吸附试验筛选分泌抗人血管内皮细胞膜蛋白的特异性单抗的阳性克隆后,将杂交瘤细胞株腹腔注射Balb/c小鼠诱生腹水.腹水中的单抗用蛋白质C琼脂糖凝胶-4B柱亲和层析纯化后,采用酶联免疫吸附试验、流式细胞术、免疫组织化学染色法及免疫印迹法对其特异性进行鉴定.结果 获得了一株可稳定分泌抗人血管内皮细胞膜蛋白单抗的杂交瘤细胞株.特异性单抗NH-2亚型为IgGl,腹水NH-2效价为1×10-6,含量为18.82 g/L.NH-2与人血管内皮细胞株和原代培养的人脐静脉内皮细胞均有特异性结合,并可识别细胞裂解液还原条件下相对分子量为40 kDa左右的蛋白多肽.NH-2对相应抗原具有高度的细胞特异性及组织特异性,在体内与正常组织的交叉反应少.结论 成功制备了抗人血管内皮细胞膜蛋白的单抗,在血管内皮细胞的生物学功能及临床意义研究方面将具有潜在的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖端芳	南华大学药物药理研究所	190	1734	19.0	31.0
2	涂剑	南华大学药物药理研究所	41	102	5.0	8.0
3	郭玉	南华大学药物药理研究所	68	305	11.0	13.0
4	周翠兰	南华大学药物药理研究所	13	48	4.0	6.0
5	郭紫芬	南华大学药物药理研究所	32	133	7.0	9.0
6	陈成立	南华大学药物药理研究所	2	3	1.0	1.0