应用实时荧光PCR技术检测构巢曲霉的初步研究

• 作者: 刘金华 史艳宇 张宇 王丽 贺丹
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 构巢曲霉 实时荧光PCR 检测
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 95-99
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 2425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2008.10.019

摘要

目的:根据构巢曲霉(Aspergillus nidulans)3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因特异位点设计并合成Taqman探针及引物,建立构巢曲霉实时荧光 PCR检测方法.方法:应用lasergene7.1软件对构巢曲霉与13种常见曲霉主要包括黑曲霉(A.niger)、烟曲霉(A.fumigatus)、杂色曲霉(A.versicolor)、土曲霉(A.terrus)、黄曲霉(A. flavus)、温特曲霉(A.wentii)、寄生曲霉(A. parasiticus)、泡盛曲霉(A. awamori)、米曲霉(A. oryzae )、棒曲霉(A.cavatus)、赤曲霉(A.ruber )、亮白曲霉(A.ochraceus)及赭曲霉(A.ochraceus)进行GAPDH基因序列比对分析,在特异位点设计引物和探针,建立构巢曲霉实时荧光 PCR检测方法,并对该方法进行特异性及敏感性分析.结果:用曲霉属22种41株不同曲霉及其他属的12株病原真菌验证实验表明,所建立的荧光PCR方法特异性强;检测灵敏度可达4.03×10-12μg/ml的模板DNA. 结论:应用实时荧光PCR技术能够有效检测构巢曲霉,该方法具有特异、灵敏、快速等特点,可在实际工作中应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宇	吉林大学基础医学院病原生物学教研室	120	744	11.0	23.0
2	王丽	吉林大学基础医学院病原生物学教研室	138	637	12.0	18.0
3	刘金华		52	438	13.0	18.0
5	贺丹	吉林大学基础医学院病原生物学教研室	32	176	7.0	12.0
8	史艳宇		15	65	5.0	7.0