致羔羊脑炎粪肠球菌PCR检测方法的建立和应用

• 作者: 剡根强 周霞 王晓兰 马勋
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 羔羊脑炎 粪肠球菌 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 595-599
• 页数: 5页
• 分类号: S852.611|Q503
• 字数: 4729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.07.010

摘要

根据肠球菌的保守tuf基因设计引物,以致羔羊脑炎粪肠球菌基因组DNA为模板,扩增出了与设计大小相一致的112 bp的基因片段,成功地建立了检测致羔羊脑炎肠球菌的PCR方法.确立的PCR反应最佳条件为:复性温度55℃,Mg2+浓度2.5 μmol/L,最佳反应模式为95℃5 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃30 S,35个循环;最后72℃延伸10 min,于4℃结束反应.该方法能检测DNA的最小量为10 fg.应用该方法对分离的致羔羊脑炎粪肠球茵、由肠球菌导致发病或死亡羔羊脏器以及人工感染死亡小鼠的主要脏器进行扩增,均能得到特异性的DNA条带;对其他7种病原菌,马腺疫链球菌C群、G群链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、羊源李氏杆菌、绵羊布氏杆菌、绵羊肺炎支原体不能扩增出特异的DNA条带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周霞	石河子大学动物科技学院	37	235	9.0	14.0
2	王晓兰	石河子大学动物科技学院	31	187	7.0	12.0
3	剡根强	石河子大学动物科技学院	144	836	15.0	23.0
4	马勋	石河子大学动物科技学院	81	218	7.0	10.0