混合酶液灌注消化揉搓法分离和培养人脐静脉内皮细胞

• 作者: 袁长吉 赵恒兰 韩伟 鲁刚 麻海春
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人脐静脉 血管内皮细胞 灌注揉搓法 细胞培养
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 技术交流
• 页码范围: 717-720,封3
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.11
• 语种: 中文

摘要

目的:建立简便、稳定的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分离和培养方法.方法:采用胰蛋白酶/胶原酶(1:1,V:V)混合酶液灌注消化揉搓方法分离获得HUVECs,简化完全培养液的组成成分(不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子),以含20%的胎牛血清(FBS)M199液进行培养;采用细胞形态学和Ⅷ因子免疫组织化学染色法及荧光DiI-Ac-LDL法进行鉴定.结果:接种培养的血管内皮细胞(VECs)4 h开始铺展贴壁,3～7 d生长最快,8～10 d汇合呈单层"铺路石"样外观,免疫组织化学染色法和荧光法鉴定纯度达95%以上.结论:混合酶液灌注消化揉搓方法获得了足够数目和纯度的VECs,保持了细胞的同源同代性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	麻海春	吉林大学第一医院麻醉科	182	948	14.0	20.0
2	韩伟	吉林大学第一医院麻醉科	74	405	10.0	16.0
3	袁长吉	吉林大学第一医院血液肿瘤科	45	222	9.0	12.0
4	赵恒兰	吉林大学第一医院麻醉科	31	116	7.0	9.0
5	鲁刚	吉林大学第一医院麻醉科	3	3	1.0	1.0