胶原酶脐带灌注消化法在人脐带静脉内皮细胞的原代分离培养中的作用

• 作者: 刘梅林 谢明斌
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐带静脉内皮细胞 原代培养 Weibel-Palade小体 Ⅷ因子抗原
• 年，卷（期）: 2009,（51）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-12
• 页数: 3页
• 分类号: R714.56
• 字数: 3017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2009.51.004

摘要

目的 探讨人脐带静脉内皮细胞原代分离培养方法,为血管内皮功能及其相关疾病的研究奠定基础.方法 采用0.1%Ⅰ型胶原酶脐带静脉灌注消化法,分离得到血管内皮细胞后,加入M199混合培养液,置于37 ℃、5%CO2培养箱中培养,以0.25%胰蛋白酶进行消化传代培养.细胞鉴定采用形态学方法、透射电镜法以及细胞Ⅷ因子免疫化学法.结果 原代人脐静脉内皮细胞约24 h后完全贴壁,第3～4天融合成单层,呈铺路石状镶嵌排列;细胞透射电镜观察可见特征性Weibel-Palade小体以及细胞表面大量微绒毛;细胞Ⅷ因子抗原免疫组化以及荧光显示均呈阳性反应,证实所分离培养细胞为人脐带静脉内皮细胞.结论 采用胶原酶脐带静脉灌注消化法可分离得到较为纯化的内皮细胞,并可在体外连续大量增殖传代,5代内的细胞均可用于研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘梅林		166	880	15.0	23.0
2	谢明斌		2	13	1.0	2.0